Влияние инкубации с криопротекторами на количество эпитопов Gal-α-1,3-Gal в клетках линии PK-15

Abstract

Трансплантация биопротезов, полученных из тканей быка и свиньи, является перспективным способом коррекции дефектов сосудов и клапанов, однако при его использовании может развиваться гиперострый иммунный ответ, обусловленный присутствием Gal-α-1,3-Gal (эпитопа α-Gal) на поверхности мембран клеток. В работе исследовано влияние проникающих и непроникающих криопротекторов на количество эпитопов α-Gal на мембранах клеток линии свиного происхождения PK-15. С помощью мечения клеток FITC-конъюгированным лектином BSI-B4 и проточной цитофлуориметрии было установлено значимое увеличение количества окрашенных клеток после инкубации с разными концентрациями диметилсульфоксида и полиэтиленгликоля с м. м. 1500 (ПЭГ-1500). Выявленный эффект может быть связан с дополнительным экспонированием эпитопов α-Gal на клеточной мембране, подвергшейся локальной деформации вследствие действия криопротекторов.Трансплантація біопротезів, отриманих із тканин бика і свині, є перспективним способом корекції дефектів судин і клапанів. Однак при його використанні може розвиватися гіперостра імунна відповідь, що обумовлена присутністю Gal-α-1,3-Gal (епітопи α-Gal) на поверхні мембран клітин. У роботі досліджено вплив проникаючих і непроникаючих кріопротекторів на кількість епітопів α-Gal на мембранах клітин лінії свинячого походження PK-15. За допомогою мічення клітин FITC-кон'югованим лектином BSI-B4 та проточної цитофлуориметрії було встановлено значне збільшення кількості забарвлених клітин після інкубації з різними концентраціями диметилсульфоксиду та поліетиленгліколя з м. м. 1500. Виявлений ефект може бути пов'язаний з додатковим експонуванням епітопів α-Gal на клітинній мембрані, яка зазнала локальної деформації внаслідок дії кріопротекторів.Transplantation of bioprostheses derived from bovine and porcine tissues is a promising method of correcting defects in blood vessels and valves, however when using it a hyperacute immune response associated with the presence of Gal-alpha-1,3- Gal (α-Gal epitope) on the surface of cell membranes can develop. We have studied the effect of penetrating and non-penetrating cryoprotectants on the amount of α-Gal epitopes on membranes of PK-15 cell line of porcine origin. Cell labeling with BSI-B4 lectin conjugated with FITC and flow cytometry revealed a significant increase in the number of fluorescent cells after incubation with various concentrations of dimethyl sulfoxide and polyethylene glycol with MW of 1500 (PEG-1500). The revealed effect may be associated with an additional exposure of α-Gal epitopes on cell membrane, locally deformed due to the action of cryoprotectants.