Исследование экспрессии генов металлотионеина в клеточной культуре фибробластов печени крыс и ее роли в выживаемости клеток при экспозиции тяжелыми металлами

Abstract

В эксперименте на культуре фибробластов фетальной печени крыс методом Real time PCR показано, что при введении в культуру хлорида цинка до конечных концентраций в культуральной среде 0,51; 1,53 и 5,09 мкмоль/л, уже через час регистрируется экспрессия генов металлотионеина МТ-1а и МТ-2. Экспрессия максимальна при концентрации 1,53 мкмоль/л. Предварительная индукция синтеза металлотионеина повышает выживаемость клеток при введении в культуральную среду солей тяжелых металлов (Hg(NO₃); Eu(NO₃)₃; Pb(OОCCH₃)₂; CdSO₄). Защита максимально эффективна при действии солей кадмия и ртути и зависит от количества предварительно введенного цинка. Наименее токсичным оказалась соль Eu(NO₃)₃, при действии которой протекторного действия металлотионеина не наблюдали, вероятно, из-за различия в механизмах транспорта Eu³⁺ и Zn ²⁺, Hg²⁺, Cd²⁺.В експерименті на культурі фібробластів фетальної печінки щурів методом Real time PCR показано, що у при введенні в культуру хлориду цинку до кінцевих концентрацій у культуральному середовищі 0,51; 1,53 і 5,09 мкмоль/л, вже через годину реєструється експресія генів металотіонеїну МТ 1а і МТ-2. Експресія максимальна при концентрації 1,53 мкмоль/л. Попередня індукція синтезу металотіонеїну підвищує виживання клітин при введенні в культуральне середовище солей важких металів (Hg (NO₃)₂; Eu(NO₃)₃; Pb(OОCCH₃)₂; CdSO₄). Захист максимально ефективний при дії солей кадмію та ртуті і залежить від кількості попередньо введеного цинку. Найменш токсичним виявилася сіль Eu(NO₃)₃, при дії якої протекторної дії металотіонеїну не спостерігали, ймовірно через відмінності у механізмах транспорту Eu³⁺ и Zn ²⁺, Hg²⁺, Cd²⁺.In experiment on fibroblasts culture of fetal rats’ liver the Real time PCR method showed that on condition of injection of zinc chloride into culture until final concentration 0,51; 1,53 and 5,09 micromole/l in culture medium metallothionein genes’ МТ%1а and МТ%2 expression is registered already in an hour. The expression reaches its maximum upon concentration 1,53 micromole/l. Preliminary induction of metallothionein synthesis increases survivance of cells on condition of injection of salts of heavy metals (Hg(NO₃)₂; Eu(NO₃)₃; Pb(OОCCH₃)₂; CdSO₄) into culture medium. The maximum efficient protection is observed under action of cadmium and mercury salts and depends on quantity of previously added zinc. The salt Eu(NO₃)₃ appeared to be the least toxic, under action of the latter protective behavior of metallothionein was not observed, probably due to the differences in transport mechanisms of Eu³⁺ and Zn ²⁺, Hg²⁺, Cd²⁺.