Метод селекции гибридом, секретирующих моноклональные антитела к тирозил-тРНК синтетазе, основанный на определении энзиматической активности

Abstract

Получена линия гибридом T₃, секретирующая моноклональные антитела к тирозил-тРНК синтетазе (КФ 6.1.1.1) из печени быка, с использованием метода селекции гибридом, основанного на определении ферментативной активности. Методом иммуноблотинга показано, что антигенная детерминанта для этих антител сохраняется в денатурирующих условиях.Отримано лінію гібридом T₃, яка секретує моноклональні антитіла до тирозил-тРНК синтетази (КФ 6.1.1.1) з печінки бика, з використанням методу селекції гібридом, заснованого на визначенні ферментативної активності. Методом імуноблотингу показано, що антигенна детермінанта для цих антитіл зберігається за денатуруючих умов.A new method for screening populations of hybrid cells secreting monoclonal antibodies (Mabs) against aminnacyl-tRNA synthetases (ARS) is developed as based on monitoring of the enzymatic activity of ARSes. The main advantage of this procedure stems from the fact that it permits using non-homogeneous ARS preparations both for immunization and for screening. While applying this procedure, hybridoma cell line T₃ secreting Mabs against bovine tyrosyl-tRNA synthetase has been produced and characterized.