Synthesis and use of disulfide-based H-phosphonate reagent for 3'- and/or 5'-oligonucleotide labelling via mercaptoalkyl linke

Abstract

Synthesis of new disulfide-based H-phosphonate reagent for solid-phase oligonucleotide functionalization with mercaptopropyl group at one or two termini is described. Using this single reagent, 3'- and 3', 5'-disulfide-linked oligonucleotides were synthesized', disulfide bonds cleaved with dithiothreitol and generated thiol groups labelled with iodoacetamidofluorescein. Tis oligonucleotides containing one or two fluorescein residues at 3'- and 5'-ends were prepared in high yields.Описано синтез нового дисульфідного Н-фосфонатного реагента для твердофазного введення в олігонуклеотиди меркаптопропільних груп по одному чи двох кінцях. З використанням цього реагента було синтезовано З'- та 5'-дисульфідні похідні олігонуклеотидів. Дисульфідні зв'язки розщеплено дитіотреїтолом і тіольні групи, що утворилися, модифіковано йодацетамідофлюоресцеїном. З високим виходом одержано оліго-Т15, які несуть один чи два залишки флюоресиеіну на У- і 5 -кінцях.Описан синтез нового дисульфидного Н-фосфонатного реагента для твердофазного введения в олигонуклеотиды меркаптопропильных групп по одному или двум концам. С использованием этого реагента синтезированы 3',5'-дисульфидные производные олигонуклеотидов. Дисульфидные связи расщеплены дитиотреитолом и образовавшиеся тиольные группы модифицированы иодацетамидофлюоресцеином. С высоким выходом получены олиго-Т15, несущие один или два остатка флюоресцеина на 3' и 5'-концах.