The effect of phosphocreatine on the distribution of different subunits of translation elongation factor 1 in gently permeabilized human fibroblasts

Abstract

Highly effective permeabilization/translation system developed recently (Negrutskii et al. (1994) Proc. Natl Acad. Sci. USA 91, 964–968) was used to study the distribution of FITC-labeled a and S submits of translation elongation factor 1 in human fibroblasts. Somewhat granular fluorescent picture observed for the both proteins distribution during active protein synthesis may be indicative of putative protein synthesis compartments. Exogenous phosphocreatine, an absolutely required agent to support the protein synthesis in permeabilized cells, is shown to influence the EF-1α distribution, while not affecting the EF-1δ. Most of EF-1α under «low energy» condition is found in nucleus. Thus, the possibility of the functional change in EF-la distribution is demonstrated supporting the Idea about transient character of EF-1α involvement into «heavy» EF-1 complex.Фосфокреатин є абсолютно необхідним компонентом суміші для білкового синтезу у безклітинних системах та перме­абілізованих клітинах. Показано, шр під впливом фосфокреа­тину змінюється локалізація α-субодиниці фактора елонгації трансляції І у пермеабілізованих клітинах вищих еукаріот. У присутності фосфокреатину EF-la має дискретну локалі­ зацію в цитоплазмі, а за його відсутністю більшість EF-1α локалізовано у ядрі. Розподіл δ-субодиниці EF-1 не залежить від наявності фосфокреатину в складі суміші для пермеабілізаціїФосфокреатин абсолютно необходим для обеспечения белково­го синтеза в бесклеточных системах и в пермеабилизованных клетках. Показано, что локализация EF-1α в пермеабилизо­ванных клетках высших эукариот зависит от присутствия фосфокреатина. в среде. Распределение EF-1α в цитоплазме в присутствии фосфокреатина носит дискретный характер, тогда как этот белок обнаруживается преимущественно в ядре в отсутствие фосфокреатина. Локализация EF-1δ не зависит от наличия фосфокреатина в смеси для пермеабилизации.