Получение и молекулярно-биологический анализ трансгенных растений гороха (Pisum sativum L), содержащих Ds-элемент кукурузы

Abstract

Обладающие повышенной регенерационной способностью растения гороха (P. sati­vum L.) трансформированы конструкцией, содержащей Ds-элемент системы контро­лирующих элементов Ac/Ds кукурузы. Трансформацию проводили кокультивированием. растительных тканей с Agrobacterium tumefaciens. Селектирован ряд устойчивых к канамицинсульфату линий. При помощи методов ПЦР-анализа и Сацзерн-блоттинггибридизации показана интеграция Ds-элемента в состав геномной ДНК гороха.Рослини гороху (P. sativum L.) з підвищеною регенераційною здатністю трансформу­вали конструкцією, яка містить Ds-елемет системи контролюючих елементів Ac/Ds ку­курудзи. Трансформацію здійснювали кокультивуванням рослинних тканин з Agrobacterium tumefaciens. Селекційовано ряд стійких до канаміцинсульфату ліній. За до­помогою методів ПЦР-аналізу і Саузерн-блотинг-гібридизації показано інтеграцію Ds-елемента до складу геномної ДНК гороху.Pea plants have been transformed with the gene construction containing Ds-element of Ac/Ds maize transposon system. The construction was introduced into pea plants using Agrobaclerium tumefaciens-mediaied transformation. Several transgenic plants have been selected on the nutritional medium contained the kanamycinsulphate as a selective agent. Concentration of NPTII protein was determined by ELISA assay. Using PCR-analyses and Southern blotting hybridization an integration of Ds-element in plant genome has been confirmed.