Стабильное торсионное напряжение в ДНК политенных хромосом Chironomus thummi

Abstract

Микрофлюориметрическим методом определяли топологическое состояние ДНК в изолированных политенных хромосомах хирономуса С. thummi, находящихся на стадии активной транскрипции. Показано, что 15 % всей ДНК хромосом, доступной интеркаляции бромистого этидия, находит­ся в торсионно напряженном состоянии. Численное значение обнаруженного напряжения, выражен­ное в относительной разности скручивания напряженной молекулы ДНК по отношению к ее релаксированной форме, равно –0,1. Показано также, что домены торсионно напряженной ДНК содержат транскрибируемые последовательности. Торсионно напряженная ДНК недоступна релаксирующему действию эндогенных топоизомераз, но теряет напряжение при добавлении экзогенной топоизомеразы I.Мікрофлюориметричним методом визначено топологічний стан ДНК в ізольованих політенних хромосомах хірономусу С. thummi, які знаходяться на стадії активної транскрипції. Показано, що 15 % усієї ДНК хромосом, яка доступна інтеркаляції бромистого етидію, знаходиться у торсійна на­пруженому стані. Числове значення виявленої напруги, виражене у відносній різниці скручення напруженої молекули ДПК по відношенню до її релаксованої форми, дорівнює –0,1. Показано також, що домени торсійно напруженої ДИК містять послідовності, що транскрибуються. Торсійно напружена ДНК є недоступною релаксуючій дії ендогенних топоізомераз, але напруга зникає при додаванні екзогенної топоізомерази І.Topological state of DNA in isolated polytene chromosomes of Chironomus thummi at the stage of the highest transcription activity has been determined by microfluorometrical method. About 15 % of chromosomal DNA stained with EtBr have been found to be under torsional stress. The value of the stress expressed as the relative twist difference is –0.1. It has been shown that domains of the stressed DNA contain transcriptionally active genes. Torsionully stressed DNA relaxes after addition of endogeneoits topoisomerase I.