Comparison of different systems for purification of recombinant proteins produced by transient expression in plants

Abstract

Three different approaches for purification of transiently expressed recombinant proteins from plants using GFP as a reporter have been successfully applied. The purification scheme including ammonium sulfate precipitation and anion-exchange chromatography was compared with two tag-based protocols applying metal affinity chromatography with a 6xHis tag and intein mediated purification with a chitin-binding affinity tag.Три різних підходи для очищення рекомбінантних білків, отриманих методом транзієнтної експресії в рослинах, було успішно застосовано з використанням GFP як репортера. Схему очищення, яка включала преципітацію сульфатом амонію і аніонообмінну хроматографію, порівнювали з протоколами тегового очищення з використанням 6xHis-тега та хітин-інтеін-опосередкованого очищення.Три различных подхода для очистки рекомбинантных белков, полученных методом транзиентной экспрессии в растениях, были успешно применены с использованием GFP как репортера. Схему очистки, включающую преципитацию сульфатом аммония и анионообменную хроматографию, сравнивали с протоколами теговой очистки с использованием 6xHis-тега и хитин-интеин-опосредованной очистки.