Моноклональні антитіла, які розпізнають нову антигенну детермінанту на D-димері фібрину людини

Abstract

Отримано гібридому, яка продукує моноклональні антитіла (монАТ) І-1D, що належать до ізотипу Ig G1, KD для них з D-димером становить 5,0·10^−10 моль/л. За результатами непрямого та конкурентного тІФА, монАТ І-1D добре реагують з D-димером, незначною мірою з D-фрагментом та не реагують з фібриногеном, фібрином desAABB і з E3-фрагментом фібриногену. Імуноблотаналізом з відновленим D-димером виявлено, що епітоп монАТ І-1D розташований на β-поліпептидному ланцюзі (Bβ 134-461). У конкурентному тІФА монАТ І-1D та отримані нами раніше монАТ ІІІ-3В не конкурують за місце зв'язування на молекулі D-димеру, тому їх можна застосовувати для кількісного визначення D-димеру в плазмі крові людини за допомогою бісайтового тІФА, латексного та імунохроматографічного методів.The hybridoma which produces monoclonal antibodies (mAbs) to D-dimer has been obtained. These mAbs react specifically with human D-dimer without cross-reaction with fibrinogen, fibrin, D- and E3-fragments. Immunoblot analysis with D-dimer showed that epitopes for these mAbs were situated in the peptide constituent of D-dimer fragment Bβ 134-461. It has also been shown that the D-dimer specific mAbs obtained can be used in sandwich ELISA as a tag-mAbs biotinilated with catch-mABs III-3B for the quantification of a D-dimer, which is one of the most impotant molecular markers of the thrombotic state, in human blood plasma.