Взаимодействие синтезируемого in vitro казеина с искусственными фосфолипидными везикулами

Abstract

Отработана модель для изучения включения внутрь лецитиновых липосом продуктов трансляции некоторых эукариотических мРНК в бесклеточной белоксинтезирующей системе из зародышей пшеницы. Показано, что при использовании в данной системе мРНК секреторного белка казеина внутри липосом накапливается¹⁴С-меченный продукт. При трансляции в системе мРНК несекреторного белка глобина ¹⁴С-метка не обнаруживается. Липосомы после инкубации их в бесклеточной системе трансляции мРНК казеина содержат его антигенные детерминанты. Полученные результаты свидетельствуют, что для транслокации казеина через бислойную липидную мембрану наличие специального рецептора необязательно. Встраивание и перенос указанного белка осуществляется ко-трансляционно за счет взаимодействия N-концевого «сигнального» пептида с липидами мембраны.Відпрацьовано модель для вивчення включення всередину лецитинових ліпосом продуктів трансляції деяких еукаріотичних мРНК у безклітинній білоксинтезувальній системі із зародків пшениці. Показано, що при використанні у даній системі мРНК секреторного білка казеїну всередині ліпосом накопичується ¹⁴С-мічений продукт. При трансляції в системі мРНК несекреторного білка глобіну¹⁴С-мітка не виявляється. Ліпосоми після інкубації їх в безклітинній системі трансляції мРНК казеїну містять його антигенні детермінанти. Отримані результати свідчать, що для транслокації казеїну через бішарову ліпідну мембрану наявність спеціального рецептора необов’язкова. Вбудовування і перенесення зазначеного білка здійснюється ко-трансляційно за рахунок взаємодії N-кінцевого «сигнального» пептиду з ліпідами мембрани.The model system is developed to study the incorporation of products of eukaryotic mRNA cell-free translation into lecithin liposomes. It is shown that in the presence of casein mRNA the ¹⁴C-labeled product of translation is accumulated inside liposomes. When mRNA for globin, a nonsecretory protein, is translated in this cell-free system, ¹⁴C-label is not found in the internal volume of liposomes. The polypeptides extracted from liposomes after their incubation in the system of casein mRNA translation interact specifically with anti-casein antibodies. These data provide evidence that the transfer of synthesizing casein through bilayered lipid membrane does not require a specific receptor. Insertion and transfer of this protein occur co-translationally, due to the interaction of «signal peptide» with membrane lipids.