Модификация структуры ДНК плазмиды рАТV8 у трансгенных мышей. 2. Физическое картирование автономного трансгенома и секвенирование клонированных фрагментов его модифицированного участка

Abstract

Показано существование в некоторых сублиниях трансгенных мышей экстрахромосомного транс-генома, производного плазмиды pATV8. Анализ его структуры и биологических свойств обнаружил, что нативность бактериальной части pATV8 – гена устойчивости к ампициллину и стартовой точки репликации сохранилась, а провирусная область исходной плазмиды существенно модифици­ровалась. Произошла элиминация части провирусной ДНК и транспозиция новой последовательно­сти. Наблюдаемые регулярная митотическая и мейотическая сегрегация, а также стабильная репликация экстрахромосомного трансгенома зависят, скорее всего, от приобретенного фрагмен­та геномной ДНК мыши.Доказано існування у деяких сублініях трансгенних мишей екстрахромосомного трансгеному, похідного плазміди pATV8. Аналіз його структури та біологічних властивостей виявив, що нативність бактеріальної частини рАТV8 – гена стій­кості до ампіциліну і стартової точки реплікації зберіглася, а провірусна область вихідної плазміди суттєво модифікува­лась. Здійснилися елімінація частини провірусної ДНК і транс­позиція нової послідовності. Регулярна мітотична і мейотич­на сегрегація, що спостерігалася, а також стабільна реплі­кація екстрахромосомного трансгеному залежить, скоріш за все, від придбаного фрагмента геномної ДНК мишіThe existence of extrachromosomal transgenome in several substrains of transgenic mice was shown. This transgenome is a modified pATV8 plasmid. Analysis of its structure and biological properties demonstrated that the ori and ampicillin resistance regions of bacterial part of pATV8 did not change, but the proviral part of initial plasmid had severely modified. Partial elimination of proviral DNA and transposition of new sequence occured. It seems that stable mitotic and meiotic segregation of exlrachromosomal transgenome and its stable replication depends upon the acquired fragment of mouse genomic DNA.