Одноетапне отримання трансформантiв Arabidopsis thaliana, вiльних вiд маркерних послiдовностей, за допомогою сайт-специфiчної рекомбiназної системи Cre/loxP пiд контролем мiнiмального 35S промотору

Abstract

У рядi публiкацiй описано використання сайт-специфiчної рекомбiназної системи Cre/loxP пiд контролем тканиноспецифiчних промоторiв для отримання трансформантiв, вiльних вiд селективних маркерних генiв (СМГ). Недолiком в даному випадку є створення специфiчних умов для проведення трансформацiї або залучення додаткових агентiв для iнiцiацiї експресiї рекомбiнази. Нами було розроблено новий пiдхiд до використання сайт-специфiчної рекомбiназної системи Cre/loxP для отримання генетично модифiкованих рослин, вiльних вiд СМГ, та встановлено ефективнiсть роботи рекомбiнази Cre у наступному поколiннi трансформованих рослин A. thaliana.В ряде публикаций описано использование сайт-специфической рекомбиназной системы Cre/loxP под контролем тканеспецифических промоторов для получения трансформантов, не содержащих селективных маркерных геном (СМГ). Недостатком в данном случае является необходимость создания специфических условий во время трансформации или вовлечения дополнительных агентов для инициации экспрессии рекомбиназы. Нами разработан новый подход к использованию сайт-специфической рекомбиназной системы Cre/loxP для получения генетически модифицированных растений, свободных от СМГ, и установлена эффективность работы рекомбиназы Cre в следующем поколении трансформированных растений A. thaliana.In a number of works, the successful use of the site-specific recombinase system Cre/loxP under the control of chemical promoters to obtain marker-free transgenic plants was described. However, providing the transformation process with the conditional or another kind of treatment to initiate the recombinase expression is the disadvantage of this method. We have developed a new approach in the site-specific recombinase system Cre/loxP to produce marker-free genetically modified plants without any treatment and shown the efficiency of Cre recombinase in the progeny of transformed plants A. thaliana.