Выделение трансляционно активной поли(А)⁺ и поли(А)⁻ мРНК из цитоплазмы прорастающих зародышей пшеницы

Abstract

Хроматографией на бензоилированной целлюлозе выделена функционально активная поли (А)⁻ мРНК из полирибосом и свободных цитоплазматических информосом. Очищенные фракции поли (А)⁻ мРНК не имеют существенных отличий по молекулярно-весовым характеристикам от цитоплазматической поли (А)⁺ мРНК. Поли (А)⁻ мРНК полирибосом и свободных информосом в одинаковой мере стимулируют включение [³⁵S]метионина в кислотонерастворимый продукт, но эффективность их трансляции существенно ниже, чем эффективность трансляции поли (А)⁺ мРНК. Эти различия, очевидно, являются метаболической особенностью исследуемых мРНК и не связаны с их выделением.

Хроматографією на бензоїльованій целюлозі виділено функціонально активну полі (А)⁻мРНК з полірибосом і вільних цитоплазматичних інформосом. Очищені фракції полі (А)⁻мРНК не мають істотних відмінностей за молекулярно-масовими характеристиками від цитоплазматичної полі (А)⁺ мРНК. Полі (А)⁻мРНК полірибосом і вільних інформосом однаковою мірою стимулюють включення [³⁵S] метіоніну в кислотонерозчинний продукт, але ефективність їхньої трансляції істотно нижча, ніж ефективність трансляції полі (А)+ мРНК. Ці відмінності, очевидно, є метаболічною особливістю досліджуваних мРНК і не пов’язані з їхнім виділенням.

Biologically active poly (A)⁻ mRNA were isolated from polyribosomes and free cytoplasmic informosomes of germinating wheat embryos by benzoylated cellulose chromato-graphy. Purified fractions of poly (A)⁻ mRNA of polyribosomes and free isoformosomes do not essentially differ from cytoplasmic poly (A) ⁺ mRNA by molecular-weight characteristics and have translational activity in the cell-free system of protein synthesis. It is shown that poly (A) ⁻mRNA of polyribosomes and free informosomes equally stimulate incorporation of [³⁵S]methionine into acidinsoluble product, but the efficiency of their translation is much lower than that of poly (A) ⁺ mRNA. The difference in the translation efficiency of cytoplasmic poly (A) ⁺ and poly (A)⁻ mRNA of wheat embryos is obviously the metabolitic peculiarity of these mRNA and is not related to their isolation.