Выделение и характеристика лейцил-тРНК-синтетазы из тканей млекопитающих

Abstract

Описан метод выделения лейцил-тРНК-синтетазы (лейРС) из печени кролика и миокарда свиньи. В отличие от фермента печени лейРС миокарда при хроматографии на оксиапатите разделяется на два компонента (E₁ и Е₂). Молекулярные массы ферментов, установленные методом электрофореза в полиакриламидном геле, составляют 185000 и 158000 для лейРС печени кролика и Е₂ миокарда свиньи соответственно. Установлено, что Е₂ содержит аминоацил-тРНК-синтетазные активности других аминокислотных специфичностей и представляет собой комплекс ферментов с молекулярной массой приблизительно 800000. Изучены оптимальные условия реакции аминоацилирования, катализируемой лейРС печени и миокарда, и определены кинетические параметры реакции.

Описано метод виділення лейцил-тРНК-синтетази (лейРС) з печінки кроля і міокарда свині. На відміну від ферменту печінки лейРС міокарда при хроматографії на оксиапатиті розділяється на два компоненти (E₁ і Е₂). Молекулярні маси ферментів, встановлені методом електрофорезу в поліакриламідному гелі, становлять 185 000 і 158 000 для лейРС печінки кроля і Е₁ міокарда свині відповідно. Визначено, що Е₂ містить аміноацил-тРНК-синтетазні активності інших амінокислотних специфічностей і представляє собою комплекс ферментів з молекулярною масою приблизно 800 000. Вивчено оптимальні умови реакції аміноацилювання, каталізованої лейРС печінки і міокарда, та визначено кінетичні параметри реакції.

The method of purification of leucyl-tRNA-synthetase (LeuRS) from rabbit liver and pig myocardium is described. Two forms (EMsub>1 and E₂) of LeuRS are distinguished by hydro-xylapatite chromatography of partially purified enzyme from pig myocardium. The molecular mass was calculated to be 185000 for LeuRS from rabbit liver and 158000 for EMsub>1 from pig myocardium. E₂ is stated to contain aminoacyl-tRNA synthetase activities of other amino acid specificities and is a complex of enzymes with molecular mass of about 800000.