Зкспрессия β-галактозидазы Escherichia coli в гепатоцитах мыши

Abstract

Исследована возможность переноса гена бактериальной β-галактозидазы (плазмида рGА293) в составе липосом непосредственно в печень двухмесячных мышей линии ВАLВ/с. Тестирование продукта экспрессии. lасZ-гена проведено иммунофлюоресцентным методом через 24 ч после инъекции. Установлено, что продукт экспрессии зтого гена обнаруживается у 20–25 % гепатоцитов, о чем свидетельствует появление яркого свечения в этих клетках. В вариантах с инъецированием физиологического раствора, плазмид рGА293 и рGА293ZΔ без липосом, а также липосом, нагруженных ДНК плазмиды рGА293ZΔ, уровень флюоресценции гепатоцитов был низким и сравним с таковым у интактных животных. Экспрессия lacZ-гена происходит с одинаковой интенсивностью в разных участках печени и не зависит от места введения. Индивидуальные животные проявляют различную ответную реакцию на введение чужеродного генетического материала.

Досліджено можливість перенесення гена бактерійної β-галактозидази (плазміда рGА293) у складі ліпосом безпосередньо в печінку двомісячних мишей лінії ВАLВ/с. Тестування продукта експрессії lасZ-гена проведено імунофлуоресцентним методом через 24 год після ін’єкції. Встановлено, що продукт експресії цього гена виявляється у 20–25 % гепатоцитів, про що свідчить поява яскравого свічення у цих клітинах. У варіантах з ін’єктуванням фізіологічного розчину, плазмід рGА293 і рGА293ZΔ без ліпосом, а також ліпосом, навантажених ДНК плазміди рGА293ZΔ, рівень флуоресценції гепатоцитів був низьким і порівнянним з таким у інтактних тварин. Експресія lacZ-гена відбувається з однаковою інтенсивністю у різних ділянках печінки і не залежить від місця введення. Індивідуальні тварини по-різному реагують у відповідь на введення чужорідного генетичного матеріалу.

The expression of the bacterial β-galactosidase gene as a part of plasmid pGA293 in the mouse liver hepatocytes has been demonstrated 24 h after direct injection of the above plasmid inclosed into liposomes into the liver.