Простой метод выделения гаплоидных протопластов из форм множественных почек риса

Abstract

Для получения протопластов риса использовали одномесячные гаплоидные растения из форм множественных почек, культивируемые стерильно на питательной среде с 0,3 М сахарозой. С этой же целью молодые листья обрабатывали раствором, содержащим 2 % фермента драйселазы и 0,4 М сахарозу, и инкубировали в течение ночи при комнатной температуре. Протопласты были получены центрифугированием с двумя фазами (верхняя содержала раствор солей W₅, нижняя — 0,4 М сахарозу) и взяты из среднего слоя между ними.

Для отримання протопластів рису використано одномісячні гаплоїдні рослини з форм множинних бруньок, стерильно культивовані на живильному середовищі з 0,3 М сахарозою. З цією ж метою молоде листя обробляли розчином, що містить 2 % ферменту драйселази і 0,4 М сахарозу, та інкубували протягом ночі за кімнатної температури. Протопласти отримано центрифугуванням з двома фазами (верхня містила розчин солей W₅, нижня – 0,4 М сахарозу) і взято з середнього шару між ними.

One-month old sterile plantlets grown on the 0.3 M sucrose medium were used for protoplast isolation. The young part of leaves were cut onto small pices (1 mm) and left for over night incubation in the 2 % v/v driselase solution containing glucose 0.4 M. Isolated protoplasts were purified by two-phase centrifugation (the upper phase contains solution of salts, the lower one — 0.4 M of sucrose and other nutritional constituents). The purified protoplasts were suspended between two phases.