Влияние условий криоконсервирования в бессывороточных, сывороткосодержащих криозащитных средах на формирование j-агрегатов в клетках коры надпочечников крыс

Abstract

Отмечено, что одним из необходимых условий для осуществления стероидогенной функции клетками коры надпочечников (ККН) является наличие потенциала на мембране митохондрий (Δψm). Для его оценки часто используется катионный краситель JC-1, который способен образовывать j-агрегаты в митохондрии при наличии потенциала на ее мембране. Проведена оценка этой способности в ККН крыс после замораживания-отогрева в бессывороточных и сывороткосодержащих криозащитных средах в концентрационном ряду диметилсульфоксида (ДМСО). Установлено, что количество ККН, содержащих j-агрегаты, увеличивалось во всех криозащитных средах после замораживания-отогрева. Данный эффект сохранялся после краткосрочного культивирования в течение 24 ч только в ККН, замороженных-отогретых в бессывороточных криозащитных средах, и был наиболее выраженным в средах с концентрациями ДМСО 5 и 7 %. ККН, криоконсервированные в сывороткосодержащих средах, по количеству клеток с j-агрегатами не отличались от нативных.

Однією з необхідних умов для здійснення стероїдогенної функції клітинами кори наднирників (ККН) є наявність потенціалу на мембрані мітохондрій (Δψm). Для його оцінки часто використовується катіонний барвник JC-1, який здатний створювати j-агрегати в мітохондрії при наявності потенціалу на її мембрані. У нашій роботі ми оцінювали цю здатність у ККН щурів після заморожуваннявідігрівання у кріозахисних середовищах з вмістом сироватки та без неї в концентраційному ряду ДМСО. Встановлено, що кількість ККН, які містять j-агрегати, збільшувалась після заморожування-відігрівання ККН у всіх кріозахисних середовищах. Даний ефект зберігався після короткострокового культивування протягом 24 годин тільки в ККН, заморожених-відігрітих у кріозахисних середовищах без сироватки і був найбільш вираженим у середовищах з концентраціями ДМСО 5 і 7%. Клітини кори наднирників, кріоконсервовані в середовищах з сироваткою, за кількістю клітин з j-агрегатами не відрізнялися від нативних.

One of necessary conditions to perform steroidogenesis by adrenal cortex cells (ACC) is the presence of the potential on mitochondrial membrane (Δψm). To assess it the cationic dye JC-1 capable of forming j-aggregates in mitochondrion with the presence of a potential on its membrane is frequently used. In this research we estimated this ability in rat ACC after freeze-thawing in serum-free and serum-enriched cryoprotective media in DMSO concentration row. It has been established that the number of ACC containing j-aggregates increased after freeze-thawing in all cryoprotective media. This effect was kept after short-term culturing during 24 hrs only in ACC, frozen-thawed in serum-free cryoprotective media and was the most manifested in the media with 5 and 7% DMSO. Adrenal cortex cells cryopreserved in serum-enriched media did not differ from native cells by the number of cells with j-aggregates.