Оценка состояния различных популяций ядросодержащих клеток кордовой и донорской крови в зависимости от метода их криоконсервирования

Abstract

Оценена сохранность и жизнеспособность популяций ядросодержащих клеток (ЯСК) кордовой и донорской крови в зависимости от метода криоконсервирования. Показано, что выделение клеток с помощью полиглюкина и последующее их замораживание под защитой 5 % диметилсульфоксида, а также выделение ЯСК методом двухэтапного центрифугирования с последующим замораживанием под защитой 10 % ПЭО-1500 позволяют сохранить количество и жизнеспособность клеток на достаточно высоком уровне. Основное снижение как сохранности, так и жизнеспособности ЯСК независимо от используемой технологии криоконсервирования происходит за счет популяции гранулоцитов, а лимфоциты и моноциты остаются более устойчивы к повреждающим факторам криоконсервирования. Показано, что мононуклеарные клетки кордовой крови более устойчивы к повреждающим факторам криоконсервирования, чем более зрелые клетки донорской крови, что проявляется в существенных отличиях показателей жизнеспособности клеток практически во всех случаях до и после их криоконсервирования.

Оцінювали збереженість і життєздатность популяцій ядровмісних клітин (ЯВК) кордової та донорської крові залежно від методу кріоконсервування. Показано, що виділення клітин за допомогою поліглюкіну і подальше їх заморожування під захистом 5% ДМСО, а також виділення ЯВК методом двохетапного центрифугування з наступним заморожуванням під захистом 10% ПЕО-1500 дозволяють зберегти кількість і життєздатність клітин на досить високому рівні. Основне зниження як збереженості, так і життєздатності ЯВК незалежно від використаної технології кріоконсервування відбувається за рахунок популяції гранулоцитів, а лімфоцити і моноцити є більш стійкі до пошкоджень факторами кріоконсервування. Було показано, що мононуклеарні клітини кордової крові більш стійкі до пошкоджень факторами кріоконсервування, ніж більш зрілі клітини донорської крові, що проявляється в суттєвих відмінностях показників життєздатності клітин практично у всіх випадках до і після їх кріоконсервування.

Quantity and viability of nucleated cell (NC) populations of cord and donor blood was assessed after implementation of various cryopreservation method. It has been shown that isolation of cells by polyglukin and their following freeze-thawing under 5% DMSO protection as well as isolation of NCs by two-step centrifugation with following freeze-thawing under 10% PEO-1500 protection allows the preservation of a quantity and viability of cells at quite a high level. Basic reduction of both quantity and viability of NCs independently on the cryopreservation methods used occurs on account of the population of granulocytes, lymphocytes and monocytes occured to be more resistant to damaging cryopreservation factors. Mononuclear cells of cord blood were shown to be more resistant to damaging cryopreservation factors unlike mature cells of adult donor blood that was manifested in significant differences of the indices of cell viability virtually in all cases prior to and after their cryopreservation.