Дослідження експресії гена екзопектатліази реІХ Klebsiella oxytoca VN13

Abstract

Методом хроматографії на папері встановлено, що пектатліаза PeІХ K. охуіоса VN13 за субстратною специфічністю належить до екзопектатліаз. Для аналізу експреси рейс гена створено гібридну конструкцію, яка містить регуляторну ділянку реІХ та кодуючу частину гена β-галактозидази ІасХ. За характером експресії β-галактозидази в K. охуіоса VN13, трансформова­ної даною конструкцією, виявлено високий конститутивний рівень експресії ІасZ гена з реІХ промотору, а також його слабку здатність до активації за присутності індукторів рослинного походження. Отримано також дані стосовно регуляції експресії генів пектинолізису K. охуіоса VN13 рослинними продуктами, що дозволяє цій бактерії утворювати з вищими рослинами стійкі асоціації.

Методом хроматографии на бумаге установлено, что пектатлиаза PelX Klebsiella oxytoca VN13 по субстратной специ­фичности относится к экзопектатлиазам. Для анализа экс­прессии pelX гена создана гибридная конструкция, содержащая регуляторную область pelX и кодирующую часть гена (β-галактозидазы lacZ. По характеру экспрессии β-галактозидазы в K. oxytoca VN13, трансформированной данной конструкцией, оп­ределен высокий конститутивный уровень экспрессии lacZ гена с pelX промотора, а также его слабая индуцибельность в присутствии индукторов растительного происхождения. По­лучены данные о регуляции экспрессии генов K. oxytoca VN13 растительными продуктами, что позволяет этой бактерии создавать с высшими растениями стойкие ассоциации симбиотического характера.

The belonging of the pectate lyase pelX of K. oxytoca VN13 to the exopectinase group was shown by paper chromatography. For an analysis of the pelX expression, fusion of the regulatory region of pelX and the coding part of reporter gene lacZ was constructed. The high constitutive level of the pelX expression and its slight inducibility in the presence of plant inducers was determined by the character of the fusion expression in K. oxytoca VN13. The data on regulation of the expression of pectinolytic genes of K. oxytoca VN13 by plant products were obtained.