Замораживание спермиев животных в лабораторных и полевых условиях

Abstract

Предложено устройство для криоконсервирования половых клеток млекопитающих и рыб в полевых условиях, обеспечивающее скорости замораживания от 0,5 до 30°С/мин. Изменение скорости замораживания достигается посредством дозирования интенсивности теплоотвода “рубашкой” от металлического “стакана”, содержащего биообъект, в горловине сосуда Дьюара Х-35. Размещение контейнеров с биообъектом в предварительно охлажденном термоблоке позволяет реализовывать изменения скорости. При помощи методов математического моделирования выбраны материалы и параметры металлического “стакана”, обеспечивающего в нем минимальный градиент распределения температуры (≤1°С/см) при охлаждении, что дает возможность замораживать суспензии клеток объемом до 5 мл в контейнере. Установлены изменение положения “рубашки” относительно металлического “стакана” и глубина его погружения в горловину сосуда Дьюара Х-35, необходимые для реализации оптимальных режимов замораживания спермиев быка и пресноводных видов рыбы. Сохранность деконсервированных спермиев карпа составила 45, а быка – 40%.

Запропоновано пристрій для кріоконсервування статевих клітин ссавців і риб у польових умовах, що забезпечує швидкість заморожування від 0,5 до 30°С/хв. Зміна швидкості заморожування досягається за допомогою дозування інтенсивності тепловідводу “оболонкою” від металевого “стакану”, що містить біооб’єкт, у горловині посудини Дьюара Х-35. Розміщення контейнерів з біооб’єктом у попередньо охолодженому термоблоці дозволяє реалізовувати зміни швидкості. За допомогою методів математичного моделювання обрано матеріали і параметри металевого “стакану” розподілу температури, що забезпечує в ньому мінімальний градієнт (≤1 °С/см) при охолодженні, який дає можливість заморожувати суспензії клітин обсягом до 5 мл у контейнері. Установлено зміну положення “оболонки” щодо металевого “стакану” і глибина його занурення в горловину посудини Дьюара Х-35, необхідні для реалізації оптимальних режимів заморожування сперміїв бугаїв і прісноводних видів риби. Збереженість деконсервованих сперміїв коропа склала 45, а бугая – 40%.

The device for cryopreservation of sexual cells of mammalians and fish under field conditions has been proposed. It provides freezing rates from 0.5 to 30°C/min. The change in freezing rate is achieved with dosed intensity of heat-conducting path by means of “mantel” from metal container with biological object in X-35 Dewar vessel neck. Location of containers with biological objects in precooled thermal block helps to realize various behaviors of rate changes. Using the methods of mathematical modeling there have been chosen the materials and parameters of metal container providing minimum gradient of temperature distribution (≤1°C/cm) during cooling that provides freezing of cell suspensions up to 5 ml in a container. The height location of “mantel” regarding metal container and depth of its submerging into X-35 Dewar vessel neck, necessary to realize optimal freezing regimens of bovine and fresh-water fish sperm have been established. Survival of frozen-thawed carp sperm made 45 and 40% for bovine ones.